如何填充色谱柱,色谱柱如果填充不均匀会有什么影响

vip2年前 (2023-09-08)花木29

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色谱柱填充自配过程

1、把空柱竖直架在滴定架上,两端向上,夹紧。色谱柱有两种,一种是两端一样长的,另一种是两端一长一短的。

2、我们做的15A分子筛。把分子筛研磨到60目,有真空泵在一头抽,另一头把研磨好的分子筛放进去就好了。填充满了后然后高温钝化一定时间!冷却后就可以使用了!这个随便说说还行,但是您得实际操作哦。

3、色谱柱应该是可以直接接在匀浆罐上的,如果不能,则需要一个转换接头。

4、常使用的高密度溶剂为碘代和溴代烷类,再与适当比例的其他溶剂相配,配制出具有密度适宜的液体,使填料能呈“失重”状态悬浮于匀浆液中,以从容地用高压泵将其压入空色谱柱中,制出填装均匀的高效色谱柱。

5、装柱前,先将载体和固定液混合,然后分次移入色谱柱中并用带有平面的玻棒压紧;供试品可溶于固定液,混以少量载体,加在预制好的色谱柱上端。洗脱剂需先加固定液混合使之饱和,以避免洗脱过程中两相分配的改变。

6、柱色谱是在一根玻璃管或金属管中迸行的色谱技术,将吸附剂填充到管中而使之成为柱状,这样的管状柱称为吸附色谱柱。使用吸附色谱柱分离混合物的方法,称为吸附柱色谱。

请问谁知道使用液相色谱仪的应注意的事项?

① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

). 样品测试结束后,就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂,同样也要用重蒸水清洗10-20分钟,方可用有机相进行保护,否则,有损色谱柱。7). 关机时,先关计算机,再关液相色谱。

液相色谱要放置在平稳牢固的台面上。液相色谱要有可靠的接地。高压气瓶要放置在阴凉、通风处,通过减压阀和机器连接。使用氢火焰时,应先开助燃气,后开氢气,关闭时应先关氢气,后关助燃气。

流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。

高效液相色谱仪的流动相选择时应注意: 尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期积累而损坏色谱柱和使检测器噪声增加。

若隔天或更长时间不使用液相色谱仪,应将两流动相瓶中均倒入纯的有机流动相(因为水流动相长时间不用会滋生细菌,污染滤头和色谱柱,导致下次开机使用时会出现鬼峰,基线不稳)。

如何正确地使用色谱柱

1、③ 一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。④ 选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。

2、根据分析物的性质选择相应的色谱柱 在选购色谱柱时,应根据分析物的性质选择相应的色谱柱。例如,对于水溶性的化合物,应该选择反相色谱柱;而对于疏水性的化合物,应该选择正相色谱柱。

3、在条件允许的情况下,最好采用与色谱柱同种填料的固相萃取柱过滤进样溶液,可以减少在色谱柱上死吸附的物质或易堵塞的大分子样品。如生物样品中的小极性的油脂类易于沉淀死吸附在C18反相色谱柱中,导致柱效降低、柱压升高。

4、新C18色谱柱在使用前,须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗,作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展,使色谱柱的性能达到好状态。

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